Metodologia parte 2 isotermas

Realizar isotermas de absorción de las esporas de Bacillus subtillis

El stock previamente establecido con una concentración de  1x10⁷ de esporas de Bacillus subtillis se coloco un militro en una solución acuosa de verde malaquita con una concentración .34mM en 20 ml volumen final  en agitación constate  y a 30°C de temperatura  constante  cada 5 minutos se obtenía una muestra de un militro y se centrifugaba hasta obtener un pellet de esporas y se midieron las absorbancias de  cada muestra a 616.5 nanómetros , este procedimiento  se realizo tres veces para observar la estabilidad en los registros de las absorbancias(ver Tabla1)  y con esto se pudo ver que la concentración del colorante es muy elevada y no da un resultado de absorbancia lineal como seria lo mejor para aplicar a la ley de Lambert- Beer. Por esta razón se realizaron 9 dilución seriadas en matraces aforados de 50 ml. En las cuales se tomaron muestras homogéneas para tomar sus absorbancias (ver Tabla 3) y lograr hacer una grafica de calibración ( grafica1.)para obtener la concentración a la cual el colorante se comporta dentro de la ley de Lamber –Beer.

Resultados de avances

Tablas de isotermas de verde de malaquita que se encuentra fueras de la ley de Lambert- Beer.

Tiempo	Absorbancia registrada
0	0.137
5	0.399
10	0.325
15	0.552
20	0.12
25	0.615

Tabla 1. Absorbancias de cinética de adsorción del colorante verde de malaquita con esporas de Bacillus subtillis.

Tiempo	Absorbancias registrada
0	3.58
5	4.1
10	3.58
15	3.9
20	3.8
25	3.7
30	4.03

 Tabla2. Control  verde de malaquita 0.34 mM sin esporas se logra verificar que esta concentración es muy elevada para la ley de Lambert-Beer.

Solución	Absorbancia registrada
1	2.8
2	2.8
3	2.8
4	2.3
5	1.17
6	0.621
7	0.251
8	0.135
9	0.044

Tabla3. Se muestra las absorbancias registradas de la diluciones realizadas para obtener la curva de calibración

Grafica1. Curva de calibración que se realizo con las diluciones con esto se obtiene la épsilon y lograr despejar a concentración de la siguiente ecuación  a=bcὲ